不同龄期家蚕蚕沙部分理化和微生物学性质研究

用生物化学和微生物学的技术方法,检测分析了2～5龄期家蚕蚕沙的部分理化性质和微生物类群的变化结果表明,2～5龄蚕的蚕沙含水率在62％～66％之间,pH值接近中性;大蚕(4～5龄蚕)蚕沙的有机质、总氮含量较小蚕(2～3龄蚕)的蚕沙高,钙、镁、钾及微量元素铁、锰、铜、锌含量则低于小蚕的蚕沙;小蚕蚕沙中重金属元素铅、铬、汞的含量比大蚕蚕沙高.各龄蚕沙中的微生物类群和数量差异不明显,数量最多的是细菌,其次是放线菌,真菌最少.     

豌豆植物瞬时表达酸性成纤维细胞生长因子研究

为探索豆科植物豌豆作为生物反应器瞬时表达外源重组蛋白的可行性,选择豌豆作为宿主植物,构建了含有酸性成纤维细胞生长因子基因的植物瞬时表达载体,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,并以叶片注射法进行接种,在豌豆植株中瞬时表达了人酸性成纤维细胞生长因子,接种后在紫外灯下跟踪观察绿色荧光蛋白的表达情况.研究结果表明,接种后8～10 d在紫外灯下可观察到GFP的表达,12～14 d GFP表达量最大.蛋白质杂交检测结果表明,酸性成纤维细胞生长因子在豌豆植物中成功表达,说明豌豆植物可作为植物瞬时表达外源蛋白新的选择平台.     

球孢白僵菌CDEP2基因原核表达、蛋白纯化及多克隆抗血清制备

类枯草杆菌蛋白酶是昆虫致病真菌重要的毒力因子,利用合成的特异性引物通过RT-PCR扩增了球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶CDEP2基因.将其与质粒pET28a连接,构建重组原核表达载体pET28-CDEP2,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测His-CDEP2融合蛋白以包涵体方式大量表达并对其进行纯化.用SDS-PAGE分离纯化的CDEP2蛋白免疫家兔,制备了多克隆抗血清.Western blotting免疫印迹检测分析表明,该抗血清对CDEP2蛋白有特异性识别能力,可用于对CDEP2蛋白功能的进一步研究.     

红棕象甲危害及其防治研究进展

红棕象甲(Rhynchophorus ferrugineus Oliver)是一种对棕榈科植物危害严重的害虫.从红棕象甲的危害状况、防治技术及防治策略3个方面对其研究情况进行了综述,阐述了近年来其主要防治措施的研究进展,对该虫在我国的进一步研究有一定参考价值,同时对该虫综合防治方案的制定也有实用意义,为棕榈科植物在生产上有效防治红棕象甲提供较为全面的指导.     

农杆菌介导pepA基因对黑曲霉菌丝体的遗传转化

通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1 347 bp的酸性蛋白酶基因pepA与黑曲霉耱化酶基因5′同源臂和3′同源臂进行拼接,构建pepA基因表达框.将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-pepA.将裁体pSZH-pepA通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉菌丝体.以PDA作为共培养培养基,乙酰丁香酮(简称AS)浓度200μmol·mL-1的条件下,28℃恒温静置培养48 h,经潮霉素筛选和PCR鉴定获得3株重组菌株.以出发菌株作为对照,对3株重组菌株静置培养7d后的发酵液上清进行酶活测定,结果发现酸性蛋白酶酶活最高达45.56 U· mL-1,而出发菌株的酸性蛋白酶酶活仅为3.72 U· mL-1,表明酸性蛋白酶基因pepA在高产糖化酶的黑曲霉中得到表达.研究建立了农杆菌介导的pepA基因导入黑曲霉菌丝体的转化体系,为实现酸性蛋白酶在黑由霉菌丝体中高效表达奠定基础.     

农杆菌介导pepA基因对黑曲霉菌丝体的遗传转化

通过重叠延伸PCR将宇佐米曲霉中1 347 bp的酸性蛋白酶基因pepA与黑曲霉糖化酶基因5’同源臂和3’同源臂进行拼接,构建pepA基因表达框。将此表达框插入载体pSZH中,构建黑曲霉同源重组表达载体pSZH-pepA。将载体pSZH-pepA通过冻融法转化农杆菌AGL1,进而通过农杆菌介导法转化高产糖化酶的黑曲霉菌丝体。以PDA作为共培养培养基,乙酰丁香酮(简称AS)浓度200μmol.mL-1的条件下,28℃恒温静置培养48 h,经潮霉素筛选和PCR鉴定获得3株重组菌株。以出发菌株作为对照,对3株重组菌株静置培养7 d后的发酵液上清进行酶活测定,结果发现酸性蛋白酶酶活最高达45.56 U.mL-1,而出发菌株的酸性蛋白酶酶活仅为3.72 U.mL-1,表明酸性蛋白酶基因pepA在高产糖化酶的黑曲霉中得到表达。研究建立了农杆菌介导的pepA基因导入黑曲霉菌丝体的转化体系,为实现酸性蛋白酶在黑曲霉菌丝体中高效表达奠定基础。     

攀西地区黑山羊mtDNA D-loop区遗传多态性研究

对攀西地区9个黑山羊类群线粒体mtDNA D-loop区序列多态性及系统进化进行探讨。结果表明:群体间共有多态位点178个,单一多态位点47个,简约信息位点131个,平均核苷酸歧义度为0.03500,有53种单倍型,说明遗传多样性丰富;而通过构建黑山羊系统树可以看出,9个类群黑山羊明显分为3支系,即支系A～C。进而揭示黑山羊是多母系起源。     

鲜食早熟葡萄醉金香在宁波市鄞州区的引种表现及高效栽培技术

基于鄞州区鲜食优质早熟葡萄醉金香引种试验,介绍了鲜食早熟葡萄醉金香及对照品种鄞红葡萄的引种表现,总结了其高效栽培技术,以期为该地区的葡萄种植提供参考。     

10个杨梅品种果实的香气成分研究

为研究不同杨梅品种果实的香气成分组成及品种间的差异,以软丝安海变、浮宫1号和东魁等10个杨梅品种果实为试材,采用气质联用(GC-MS)技术,对果实香气成分进行分析鉴定。结果表明:10个品种杨梅果实中共分离鉴定出141种化学成分,深红种含有的香气成分最多,共42种,软丝安海变和八贤道含有的香气成分最少,均只含有12种;10个品种果实中均含有烷烃和烯烃,是杨梅果实香气成分的主体;1-石竹烯是杨梅果实的重要香气成分,是唯一在10个杨梅品种中均被鉴定出的香气成分。不同杨梅品种果实间的香气成分差异较大,除了品种因素外,栽培环境可能也是形成差异的一个重要因素。     

乌龙茶新品种丹桂区域试验

以黄旦为对照,在广东、广西、湖南3个区试点对丹桂的种植成活率、生长势、物候期、鲜叶产量、制茶品质、抗性等方面进行6年(2003～2009)的全国茶树品种区域试验。结果表明:丹桂种植成活率高、生长势好、物候期早、产量高、制茶品质优良、抗逆性强,是一个早生、优质、高产的乌龙茶新品种,适宜在广东、广西、湖南及相似地区种植和推广应用。